我有一個 LIVE/DEAD BacLight 細(xì)菌活力試劑盒，里面含有 SYTO 9 和碘化丙啶。我是否能夠使用此試劑盒對吞噬細(xì)菌的真核細(xì)胞進(jìn)行染色并確定細(xì)菌是活的還是死的？

不幸的是，沒有。SYTO 9 將標(biāo)記活細(xì)胞或死細(xì)胞的細(xì)胞核，包括真核細(xì)胞。碘化丙啶是細(xì)胞不滲透的，只會進(jìn)入死細(xì)胞。如果真核細(xì)胞死亡，它們也會用碘化丙啶標(biāo)記。如果真核細(xì)胞是活的，碘化丙啶將無法進(jìn)入，因此不會標(biāo)記里面的細(xì)菌，無論細(xì)菌是活的還是死的。我們不知道有任何方法可以在細(xì)菌被細(xì)胞吞噬后對它們進(jìn)行活力測定。

碘化丙啶 （PI） 是否可以用戊二醛或多聚甲醛 （PFA） 固定？

PI 不能用戊二醛或 PFA 固定。兩種試劑都通過交聯(lián)胺來固定。PI 和其他核酸染色劑本身不會與核酸共價(jià)結(jié)合，并且這些固定劑不會將染料與核酸交聯(lián)。
一種可修復(fù)的核酸染色劑是單疊氮化乙錠溴化物 （EMA），貨號。E1374）;它在暴露于光線激活后與核酸共價(jià)結(jié)合。