技術(shù)文章
TECHNICAL ARTICLES我在直接使用DynamisAGT培養(yǎng)基培養(yǎng)CHO細胞的過程中遇到困難。我該如何處理？請參考如下的逐步適應步驟：如果您在切換至某一比例時培養(yǎng)時遇到問題，請以前面的比例進行傳代2-3次。1.對培養(yǎng)在含5-10%血清的傳統(tǒng)培養(yǎng)基或其他無血清培養(yǎng)基中的CHO細胞進行逐步適應培養(yǎng)時，請使用3×10E5–4×10E5活性細胞/mL的接種密度。2.使用Countess自動細胞計數(shù)儀監(jiān)控細胞生長情況，直至活性細胞密度達到≥1×10E6個細胞/mL。3.按照DynamisAGT培養(yǎng)基：原始培養(yǎng)...
我能使用ProBond或Ni-NTA純化系統(tǒng)來純化Expi293表達培養(yǎng)基中的目的蛋白嗎？Expi293表達培養(yǎng)基并不直接兼容ProBond或Ni-NTA純化系統(tǒng)。我們推薦在用His標簽的純化操作之前進行一次緩沖體系交換或樣本透析。我能在Expi293表達系統(tǒng)中使用另外一種293細胞系嗎？大多數(shù)293細胞系均能適應從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培養(yǎng)基向Expi293表達培養(yǎng)基中的切換按照手冊中所描述的直接切換法或序貫切換法來操作，大多數(shù)293細胞系均能適應從傳統(tǒng)含血清或其它無血清培...
DMSO細胞凍存液注意事項：DMSO毒性控制：常溫下毒性高，配制時需在4℃操作，避免直接接觸細胞。復蘇后需離心去除DMSO，減少對細胞的持續(xù)損傷。無菌操作：DMSO本身有抑菌作用，但配制過程仍需無菌條件。凍存盒使用：程序降溫盒需恢復至室溫再使用，異丙醇需每凍存5次更換一次。細胞狀態(tài)：凍存前確保細胞處于對數(shù)生長期，密度≥80%。避免污染，凍存前檢查細胞形態(tài)及活性。保存時間：-80℃保存不超過半年，液氮中不超過2年。定期復蘇檢測存活率，建議每6個月驗證一次。
GlutaMAX補充劑是L-谷氨酰胺的改良型替代品，以L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽形式存在，具有更高的穩(wěn)定性，可顯著減少細胞培養(yǎng)中的氨毒性，改善細胞健康，適用于哺乳動物細胞、干細胞等多種類型的長期和高密度培養(yǎng)。核心優(yōu)勢：穩(wěn)定性強與傳統(tǒng)L-谷氨酰胺易自發(fā)分解產(chǎn)生氨不同，GlutaMAX™通過二肽鍵保護谷氨酰胺，僅在細胞需要時裂解釋放，從而避免氨的積累。在室溫(15-30°C)下可穩(wěn)定保存24個月，支持長期實驗規(guī)劃。減少氨毒性氨是細胞代謝的毒性副產(chǎn)物，會抑制細胞生長、...
通常情況下，胰酶可在冰箱中保存一周。不過，這一時間長度也隨著這一周內(nèi)的加熱次數(shù)和使用頻率而變化。同時，它也與細胞粘附的緊密程度有關(guān)，胰酶在非冰凍條件下每天都會喪失一定的活性。這種胰蛋白酶的液體制劑含有EDTA和酚紅。Gibco胰蛋白酶-EDTA由胰蛋白酶粉末制成，胰蛋白酶粉末是源自豬胰腺的蛋白酶的輻照混合物。由于其消化強度，胰蛋白酶廣泛用于細胞解離、常規(guī)細胞培養(yǎng)傳代和原代組織解離。解離所需的胰蛋白酶濃度因細胞類型和實驗要求而異。查看全系列的Gibco胰蛋白酶溶液和推薦的解離條...
無血清培養(yǎng)基是一種不添加動物血清(如胎牛血清、馬血清等)的細胞培養(yǎng)基，通過添加生長因子、激素、貼壁因子、轉(zhuǎn)運蛋白等替代血清中的活性成分，以滿足細胞生長、增殖和功能表達的需求。其設(shè)計旨在克服血清培養(yǎng)基的局限性，廣泛應用于生物制藥、細胞治療、疫苗生產(chǎn)、基礎(chǔ)研究等領(lǐng)域。無血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢：減少批次間差異血清成分復雜且批次間差異大，可能導致實驗結(jié)果不可重復。無血清培養(yǎng)基成分明確，可顯著提高實驗的一致性和可重復性。降低污染風險血清可能攜帶病毒、支原體、內(nèi)毒素等污染物，而無血清培養(yǎng)基通過...
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